9.8.4 기억상실성 패독

  가. 시험법 적용범위
      수산물 중 패류, 갑각류에 적용한다.

  나. 분석원리
      검체 중의 도모익산(Domoic acid)을 50% 메탄올 용액으로 추출한 후 액체크로마토그래프로
      측정한다.

  다. 장치
      1) 액체크로마토그래프 : 자외선흡광검출기(UV photometric detector)를 사용한다.
      2) 액체크로마토그래프,질량분석기 (LC-MS/MS)를 사용한다.

  라. 시약 및 시액
      1) 아세토니트릴 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것
      2) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것
      3) 추출용액(50% 메탄올 용액) : 물 500 mL에 메탄올 500 mL를 가한다.
      4) 10% 아세토니트릴 용액 : 물 90 mL에 아세토니트릴 10 mL를 가한다.
      5) 0.1% 트리플루오로아세트산(Trifluoroacetic acid) 함유 용액 : 트리플루오로아세트산 1 mL를
          정확히 취하여 물 990 mL에 가하고, 물로 최종 1 L가 되게 한다.
      6) 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 아세토니트릴 용액 : 트리플루오로아세트산 1 mL를
          정확히 취하여 아세토니트릴 990 mL에 가하고, 아세토니트릴로 최종 1 L가 되게 한다.
      7) 표준원액 : 도모익산 표준물질을 10% 아세토니트릴 용액에 녹여 10 µg/mL가 되게 한다.
      8) 표준용액 : 도모익산표준원액(10 µg/mL)을 10% 아세토니트릴 용액으로 희석하여 농도가
          0.2～2.0 µg/mL의 범위가 되도록 하여 검량선 작성용 표준용액으로 한다.

  마. 시험용액의 조제
      검체를 세척 및 탈수과정을 거친 후, 껍질을 제거한 가식부 약 100 g을 취하여 균질화하고,
      균질화된 검체 10 g를 정밀하게 취하여 추출용액 40 mL을 가한 후 다시 2분간 균질화한다.
      시료용액을 원심분리한 후 상등액을 시린지 필터(pore size : 0.2 µm)로 여과한 것을
      시험용액으로 한다. 단, 시험용액의 농도가 높아 검량곡선의 농도범위를 벗어날 경우
      농도 범위 내로 희석하여 사용한다.

  바. 시험조작
      1) 액체크로마토그래프의 측정조건
          가) 칼럼 : C18(150 mm × 4.6 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것
          나) 가드칼럼 : C18(4.0 mm × 3.0 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것
          다) 칼럼온도 : 35°C
          라) 이동상 : 0.1% 트리플루오로아세트산 함유 용액 : 0.1% 트리플루오로아세트산 함유
          아세토니트릴 용액(85 : 15, v/v)
          마) 이동상 유량 : 1.0 mL/분
          바) 시료주입량 : 5 µL
          사) 검출파장 : UV 242 nm
      2) 검량선 작성
          표준원액을 10% 아세토니트릴 용액으로 희석하여 농도가 0.2~2.0 µg/mL의 범위가 되도록
          하여 검량선을 작성한다.
      3) 표준품의 크로마토그램